酸性蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶制备试剂盒


  • 商品名称: 酸性蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶制备试剂盒
  • 产品货号: 02.12039-25
  • 品牌: EallBio/亿奥邦
  • 储存条件: 2-8℃
  • 有效期: 1年

所属分类:

蛋白电泳

目录价:

¥ 480

市场价

¥ 480

  • 产品规格
    • 25块小胶
    • 50块小胶
数量
-
+

库存剩余

1998

隐藏域元素占位

  • 产品描述
    • 商品名称: 酸性蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶制备试剂盒
    • 产品货号: 02.12039-25
    • 品牌: EallBio/亿奥邦
    • 储存条件: 2-8℃
    • 有效期: 1年

    产品简介:

    亿奥邦生产的的酸性蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶制备试剂盒是按照经典方法配制而成。适合分离酸性非变性蛋白。本试剂盒提供了配制酸性蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶。本试剂盒可配制不同规格、不同聚合度的native-PAGE胶(即非变性聚丙烯酰胺凝胶)约25块。

    操作说明(仅供参考)

    1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,不同浓度的PAGE分离胶的最佳分离范围:

    PAGE分离胶浓度

    最佳分离范围

    6%胶

    50-150 kD

    8%胶

    30-90 kD

    10%胶

    20-80 kD

    12%胶

    12-60 kD

    15%胶

    10-40 kD

    2.先在 PAGE 胶凝固剂干粉中加入蒸馏水或去离子水(每克 PAGE 胶凝固剂需加水10 ml)配置成10%溶液,将溶液分装成小体积后冻存于-20 ℃,制备凝胶时融化后使用。4 ℃保存有效期7天。

    3.1x非变性电泳缓冲液配置:取1袋1 L 10×非变性电泳缓冲液,加入800 ml去离子水或双蒸水使粉末完全溶解,然后用水定容至1000 ml,即为10×非变性电泳缓冲液。取100 ml 10×非变性电泳缓冲液加水定容至1000 ml,得到1x非变性电泳缓冲液。

    4.根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。

     

    分离胶15%

    分离胶12%

    分离胶10%

    分离胶8%

    浓缩胶4%

    总体积

    10 ml

    10 ml

    10 ml

    10 ml

    5 ml

    30% Acr-Bis (29:1)

    5 ml

    4 ml

    3.3 ml

    2.7 ml

    0.67 ml

    分离胶缓冲液

    2.5 ml

    2.5 ml

    2.5 ml

    2.5 ml

    0

    浓缩胶缓冲液

    0

    0

    0

    0

    0.625 ml

    10%PAGE胶凝固剂

    100 μl

    100 μl

    100 μl

    100 μl

    75 μl

    PAGE胶促凝剂

    10 μl

    10 μl

    10 μl

    10 μl

    7.5 μl

    ddH2O

    2.4 ml

    3.4 ml

    4.1 ml

    4.7 ml

    3 ml

    5. 跑胶的时间和分离胶的浓度以及电压的大小有关,建议做预实验或者查看文献选择合适的电压,来获得最佳分离效果。

    注意事项:

    1.PAGE 胶促凝剂和 10%PAGE 胶凝固剂最后加,在加入前需混匀前面所加试剂。

    2.PAGE 胶促凝剂易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节凝胶聚合催化剂和TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。

    3.一般的,在常温下胶 30 分钟内可以凝固,如温度过低,可放 37℃温箱凝固。

    4.灌完分离胶后,轻轻的加1 ml ddH2O封上层,胶凝固后可见到分界线。

    5.灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸水纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后,放 入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。

    6. 配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整30% Acr/Bis 的量(需要浓度×总体积/30%),最后用水补足总体积。

    7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关文献

相关下载

logo

搜索热词:细胞库 生化检测试剂盒 细胞生物学 分子生物学产品 蛋白与免疫产品 化学及生化试剂干粉