小鼠组织直接PCR裂解液 Lysis Buffer for Direct PCR(Mouse Tissue)


小鼠组织直接PCR裂解液,适用于多种小鼠组织粗裂解模板的制备

  • 商品名称: 小鼠组织直接PCR裂解液 Lysis Buffer for Direct PCR(Mouse Tissue)
  • 产品货号: 04.10012-100
  • 品牌: EallBio/亿奥邦
  • 储存条件: 2~8℃
  • 有效期: 24个月

所属分类:

核酸提取/纯化系列

目录价:

¥ 1260

市场价

¥ 1260

  • 产品规格
    • 100ml
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-
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  • 产品描述
    • 商品名称: 小鼠组织直接PCR裂解液 Lysis Buffer for Direct PCR(Mouse Tissue)
    • 产品货号: 04.10012-100
    • 品牌: EallBio/亿奥邦
    • 储存条件: 2~8℃
    • 有效期: 24个月

    小鼠组织直接PCR裂解液,适用于多种小鼠组织粗裂解模板的制备

    产品简介

    本产品是一款从小鼠尾等组织中简便制备粗提裂解液的试剂,可直接利用小鼠尾巴、耳朵、脚趾等组织经Lysis Buffer、Proteinase k(自备)简单裂解处理后进行PCR扩增,无需过夜消化、酚氯仿抽提或柱式纯化等操作,使用简便,极大缩短实验耗时。

    产品特点

    • 操作简便:无需提取基因组DNA,裂解物可直接用于PCR;
    • 安全环保:无有机试剂,减少耗材消耗;
    • 适用广泛:适用于多种小鼠组织的直接扩增。

    适用范围

    本产品适用于多种小鼠组织粗裂解模板的制备。

    注意事项

    1. 为了避免样品间出现交叉污染,需准备多个取样工具,如需反复使用可在每次取样后用2%次氯酸钠溶液或核酸清洁剂(目录号:04.10013 )对工具表面进行清洁;
    2. 建议使用新鲜采取的小鼠组织,取样量不宜过大,以避免影响扩增结果;
    3. Lysis Buffer的保存条件为2~8℃,若低温保存出现沉淀,在使用前必须加热充分溶解后再使用。

    操作示例

    简单流程

    用裂解液裂解鼠尾,55℃孵育30 min,98℃加热处理3 min,取1 μL裂解液进行PCR基因型研究。

    详细流程

    1. 裂解液配制

    根据需要裂解的小鼠样品数量配制组织裂解液(组织裂解液应现用现配,且充分混匀后使用),Proteinase K需客户自备,单个样品所需试剂比例如下:

    组分

    体积

    Proteinase K(20 mg/mL)

    4 μL

    Lysis Buffer

    200 μL

    1. 样品准备与裂解

    推荐组织使用量:

    组织类型

    小鼠尾尖

    小鼠耳朵

    小鼠脚趾

    推荐用量

    1~3 mm

    2~5 mm2

    1~2个

    取适量小鼠组织样品于干净的离心管中,向每个离心管中加入200 μL新鲜的组织裂解液,涡旋震荡后在55℃下孵育30 min,然后98℃加热处理3 min。

    1. 离心

    将裂解产物充分震荡混匀,12,000 rpm离心5 min,上清液可作为模板直接用于PCR扩增。模板如需保存,可将上清液转移至另一个无菌离心管中,并置于-20℃保存,保存时间为2周。

    1. PCR扩增

    裂解产物要恢复至室温后再使用。此外,建议裂解产物的使用量在PCR反应体系的1/20以下,加入量过高时,可能会抑制PCR扩增。

    常见问题与解决办法

    Q:无目的条带?

    A:

    1. 裂解产物过量。选择最合适的模板用量,一般不超过体系的1/20;
    2. 取样量过大。将裂解产物稀释10倍后扩增,或减少取样量重新裂解;
    3. 组织样品不新鲜。建议使用新鲜的组织样品;
    4. 引物质量差。使用基因组DNA进行扩增验证引物质量,优化引物设计。

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