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产品简介
EABRed是一种安全、灵敏、稳定的荧光核酸凝胶染色试剂，适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色，经过本产品染色的DNA条带在紫外光投射下呈现红色荧光，可以替代溴化乙锭（EtBr） 。艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于溴化乙锭（EtBr），使用更加安全。
EABRed和EB具有相同的光谱特性，不需要更换成像系统，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在300 nm紫外光附近可得到最佳激发。注意EABRed不能被488 nm氩离子激光器（如蓝光透射仪）或相似波长的可见光完全激发，因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。
产品特点
² 安全无毒：EABRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内；
² 灵敏度高：适用于各种分子量DNA电泳，对于微量的DNA具有更高的检测灵敏度；
² 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低；
² 适用范围广：胶染法（电泳前染色）和泡染法（电泳后染色）均可；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于dsDNA、ssDNA和RNA染色。
适用范围
适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色。
注意事项
1.染料无需低温冷藏，请于室温下避光储存，避免沉淀。若出现沉淀，请将染料置于45~50℃ 2 min，振荡使充分溶解后再使用；
2.由于EABRed的高灵敏性， 建议减少DNA样品上样量，推荐已知浓度样品的上样量为50~200 ng/泳道；
3.聚丙烯酰胺凝胶电泳请使用泡染法。
使用方法
一、胶染法（电泳前染色，用法同EB）
1.配制合适浓度的琼脂糖凝胶；
2.用微波炉加热使琼脂糖完全融化；
3.加入EABRed使其终浓度为1× （即100 mL凝胶中加入10 μL EABRed 10,000×水溶液），此时溶液呈淡粉色；
4.将含有1×EABRed染液的琼脂糖溶液倒入胶槽中，插入齿梳，室温凝固；
5.按照常规方法进行电泳；
6.用302 nm激发的UV凝胶成像系统观察结果。
二．泡染法 （电泳后染色）
1.按照常规方法进行电泳；
2.使用0.1 M NaCl溶液稀释EABRed染液至3×染色液（例如将15 μL EABRed 10,000×水溶液加入50 mL 0.1 M NaCl溶液中）；
3.将凝胶小心地放入合适的容器中，缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶，室温摇床孵育30 min（对于含3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶，需孵育30 min~1 h，时间随着丙烯酰胺含量增加而延长。单次使用的3×染色液可重复使用3次左右，室温避光保存）；
4.用302 nm激发的UV凝胶成像系统观察结果。
常见问题与解决办法
Q1：使用胶染法，出现DNA条带弥散、拖尾或弯曲等现象？
A1：
1) 确保使用的染料终浓度为1×；
2) DNA上样量过多。将DNA样品上样量减少至1/3或1/5；
3) 凝胶浓度不合适。检测大片段DNA建议使用低浓度琼脂糖凝胶；
4) 样品中loading buffer过量。loading buffer中的SDS可能会影响电泳效果，建议减少loading buffer用量；
5) 使用合适的电压，建议5~10 V/cm；
6) 使用新鲜的电泳缓冲液。
Q2：使用胶染法发现DNA迁移率存在差异？
A2：
1) 将DNA样品上样量减少至1/3或1/5；
2) EABRed分子量较大，大分子量导致DNA的迁移速率可能受到染料与DNA比率的影响。因此不建议将EABRed直接添加到loading buffer中使用，这会导致条带迁移不准确；
3) 可使用泡染法准确确定DNA条带大小。
Q3：ssDNA和RNA染色效果不如dsDNA？
A3：
EABRed对于dsDNA的灵敏度是ssDNA或RNA的5倍，可适当提高ssDNA或RNA上样量。
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