羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法)


  • 商品名称: 羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法)
  • 产品货号: 02.13069-100
  • 品牌: EallBio/亿奥邦
  • 储存条件: 2-8℃
  • 有效期: 1年

所属分类:

抗氧化系列

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  • 产品描述
    • 商品名称: 羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法)
    • 产品货号: 02.13069-100
    • 品牌: EallBio/亿奥邦
    • 储存条件: 2-8℃
    • 有效期: 1年

    产品简介:

    羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。

    HOz/Fe2+通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在510nm处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。

    注意:实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

    自备实验用品:分析天平、紫外分光光度计、比色皿和蒸馏水。

    使用说明(仅供参考):

    一、样品的制备:

    1.组织:按照组织质量(g):蒸馏水体积(ml)1:5~10的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1 ml蒸馏水)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃℃离心10min,取上清,置冰上待测。

    2.血清、果汁等液体样品可直接测定。

    3.提取物(或者药物)可配制成一定浓度,如5 mg/ml。

    二、测定步骤:

    1.紫外分光光度计预热30min,调节波长至510nm。

    2.将试剂二按1:400以水稀释,现用现配。

    3.在4 ml EP管中加入如下试剂

    表1  OH自由基清除反应体系构建

    A(对照管) B(样品管) C(对照参比管) D(样品参比管)
    100μl蒸馏水 100μl样品液 100μl蒸馏水 100μl样品液
    100μl试剂一 100μl试剂一 100μl试剂一 100μl试剂一
    200μl试剂二 200μl试剂二 200μl试剂二 200μl试剂二
    反应10分钟
    100μl试剂三 100μl试剂三 100μl无水乙醇 100μl无水乙醇

    加试剂三后离心3min,吸取上清液2ml于510 nm处测定吸光度。管A和C只需测定一次。若无510nm 波长也可选其附近。

    计算公式:  清除率(%)=(A-C)-(B-D)/(A-C)x100%;A、B、C、D为510 nm处各管吸光度值

    注意事项:

    为了比较不同样品羟自由基清除能力,对于同一批样品必须加入等量的样品,血清、组织匀浆果汁等液体样品加入同样体积,提取物(或者药物)配制成同样浓度。

    附录(仅供参考):

    Vc(mg/ml) 0.015625 0.03125 0.0625 0.125 0.25 0.5 1
    吸光度 5.27 6.8 13.94 18.51 27.13 45.89 97.6

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