液体样本丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)ALT/GPT 活性检测试剂盒(赖氏法)


  • 商品名称: 液体样本丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)ALT/GPT 活性检测试剂盒(赖氏法)
  • 产品货号: 02.14090-100
  • 品牌: EallBio/亿奥邦
  • 储存条件: 各组分按要求保存
  • 有效期: 6个月

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其他

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  • 产品描述
    • 商品名称: 液体样本丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)ALT/GPT 活性检测试剂盒(赖氏法)
    • 产品货号: 02.14090-100
    • 品牌: EallBio/亿奥邦
    • 储存条件: 各组分按要求保存
    • 有效期: 6个月

    产品简介:

    丙氨酸氨基转移酶又称谷丙转氨酶、谷氨酸转氨酶、丙氨酸氨基转换酶,英文名: Alanine aminotransferase(简称ALT)或Glutamatepyruvatetransaminase(简称GPT)。主要存在于肝细胞浆内,正常情况下,细胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞被破坏,就可以使血清酶增高一倍。

    谷丙转氨酶(ALT)被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。谷丙转氨酶还存在于心脏和骨骼肌中。本试剂盒可以检测血清、血浆、或组织匀浆液上清等生物样品中的ALT活性。

    适用范围:测定各类动物血清、血浆、唾液、尿液等。

    操作说明:

    1. 酶标仪预热30 min以上,调节波长至520 nm。

    2. 丙酮酸标准品工作液的配制:按下表用试剂一和试剂二将丙酮酸标准品稀释成 0 μg、1.1 μg、2.2 μg、3.3 μg、4.4 μg、5.5 μg 六个浓度,充分混匀。丙酮酸0浓度孔只加试剂一和试剂二,以此作为空白孔调零,按照下述操作步骤操作,而后在520 nm处读吸光度,绘制标准曲线。

    使用酶标仪测定,丙酮酸标准品工作液稀释比例:

    试剂一(μl)

    4

    4

    4

    4

    4

    4

    试剂二(μl)

    20

    18

    16

    14

    12

    10

    丙酮酸标准品(μl)

    0

    2

    4

    6

    8

    10

    对应丙酮酸(μg)

    0

    0.44

    0.88

    1.32

    1.76

    2.2

    3. ALT 活性测定:

    取4 μl丙酮酸标准品工作液、样本、蒸馏水,分别加入丙酮酸标准品工作液管、样本及样本对照管、空白管,再向丙酮酸标准品工作液管和样本管中加入20 μl试剂二,充分混匀,37 ℃孵育30分钟;每管中加入20 μl试剂三,再向样本对照管和空白管中加入20 μl试剂二,充分混匀,37℃孵育20分钟;最后每管加入200 μl试剂四,充分混匀,室温静置10分钟,于波长520 nm酶标仪测定各标准品和样本管吸光度值

    参照下操作表在EP管中分别加入下列试剂

     

    丙酮酸标工作液

    样本管

    样本对照

    白管

    样本(μl)

    --

    4

    4

    --

    标准品工作液(μl)

    4

    --

    --

    --

    蒸馏水(μl)

    --

    --

    --

    4

    试剂二(μl)

    20

    20

    --

    --

    充分混匀,37℃,孵育30分钟

    试剂三(μl)

    20

    20

    20

    20

    试剂二(μl)

    --

    --

    20

    20

    充分混匀,37℃,孵育 20分钟

    终止试剂(μl)

    200

    200

    200

    200

    充分混匀,室温静置10分钟,于波长520 nm酶标仪测定各标准品和样本管吸光度值,注意设置样品空白管。

    4. 酶标仪测定ALT酶活力:

    未稀释样本ALT酶活力=(样本管丙酮酸微克数—样本对照管丙酮酸微克数)×250/2.5

    稀释样本ALT酶活力=(样本管丙酮酸微克数—样本对照管丙酮酸微克数)×稀释倍数×250/2.5

    注意事项

    1. 谷丙转氨酶的正常参考值为0~40 U。高于40 U即称为谷丙转氨酶升高。

    2. 标准曲线上数值在20~100 U是准确可靠的,超过200 U时,需将样品稀释。

    3. 溶血标本不宜使用,因血细胞内转氨酶活力较高,会影响测定结果。

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