植物花色苷含量检测试剂盒


  • 商品名称: 植物花色苷含量检测试剂盒
  • 产品货号: 02.13074-100
  • 品牌: EallBio/亿奥邦
  • 储存条件: 2-8℃避光保存
  • 有效期: 6个月

所属分类:

抗氧化系列

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¥ 992

市场价

¥ 992

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    • 100T
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  • 产品描述
    • 商品名称: 植物花色苷含量检测试剂盒
    • 产品货号: 02.13074-100
    • 品牌: EallBio/亿奥邦
    • 储存条件: 2-8℃避光保存
    • 有效期: 6个月

    产品简介:

    花色苷是一类可食用的易溶于水等溶剂的天然色素。花色苷使植物呈现多彩的颜色,本身更具有多种保健作用,因而在天然食用色素、保健品和医药行业都有着广阔的应用前景。

    根据花色苷在不同pH下的结构性质测定花色苷含量,在pH为1时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当 pH 为4.5 时,花色苷转变为无色査尔酮形式在 530nm 处无吸收峰,通过测定不同 pH下的530nm和700nm处的吸光度值计算样本中花色苷的含量。

    【注:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。】

    需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器和蒸馏水。

    操作步骤:

    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

    按照样本质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1ml提取液),充分今浆后转移多到EP管中,提取液定容至1ml,盖紧后60℃C浸提30mimn,期间可震荡数次。12000mpm,常温离心10min,取上清液待测。

    二、测定步骤

    1.可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,可见分光光度计蒸馏水调零。

    2.加样表:在96孔板中分别加入

    试剂名称(μl) 测定管1 测定管2
    样本 20 20
    试剂一 180 -
    试剂二 - 180

    充分混匀后测定测定管1和测定管2分别在530 nm和700nm处的吸光度,测定管1在530nm和700 nm处的吸光值记为A1、A1’,测定管2在530nm和700nm处的吸光值记为A2、A2’,计算AA=(A1-A1’)-(A2-A2’)。

    花色苷含量计算:

    A、以微量玻璃比色皿计算:

    1.按样本质量计算:

    花色苷含量(μmol/g 质量)=[AA÷(εxd)x103xF]xV提取÷W=0.037xΔAxF÷W

    2.按样本蛋白浓度计算

    花色苷含量(μmol/mg prot)=[ΔA÷(εxd)x10³xF]xV提取÷(CprxV提取)=0.037xΔAxF÷CprF:稀释倍数,该反应体系下为10;d:比色皿光径,1cm;W:样本质量,g;ε:花色的摩尔消光系数,2.69x10*ml/mmol/cm;V提取:提取液总体积,1ml;10:单位换算系数,1mmol=103umol;Cpr:样本蛋白浓度,mg/ml(蛋白浓度需用PBS单独提取后自行测定)。

    B、以96孔板计算:

    1.按样本质量计算

    花色苷含量(μmol/g 质量)=[ΔA÷(εxd)x103xF]xV提取÷W=0.062xΔAxF÷W

    2.按样本蛋白浓度计算

    花色苷含量(μmol/mg prot)=[ΔA÷(εxd)x103xF]xV提取÷(CprxV提取)=0.062xAAxF÷CprF:稀释倍数,该反应体系下为10;d:96孔板光径,0.6cm;W:样本质量,g;:花色苷的摩尔消光系数,2.69x10mlmmol/cm;V提取:提取液总体积,1m;10:单位换算系数,1mmol=103umol;Cpr:样本蛋白浓度,mg/ml(蛋白浓度需用PBS单独提取后自行测定)。

    注意事项:

    1.如果A1大于1,可以适当加大稀释倍数,保证总体积200m不变,如10m上清液和190 ml试剂一(相当于稀释20倍);如果A1小于0.1,可以适当缩小稀释倍数,保证总体积不变,如100m上清液和100m试剂一(相当于稀释2倍),使A1保持在0.1~1范围内,可提高检测灵敏度:注意应同样调整上清液和试剂二体积比例;计算时以实际稀释倍数代入计算公式中。

    2.因提取液会使蛋白变性,若使用蛋白浓度计算需用PBS单独提取后自行测定

    实验实例:

    取0.1g葡萄皮加入1ml提取液充分匀浆后转移到EP管中,封口膜封口防止挥发,60℃浸提30 min期间可震荡数次,提取后提取液定容至1m,离心取上清后按照测定步骤操作,用96孔板测得计算AA=(A1-A1’)-(A2-A2’)=(0.573-0.060)-(0.120-0.060)=0.453,按样本质量计算含量得:

                                                  花色苷含量(μmolg 质量)=0.062xΔAxF÷W=0.062x0.453x10-0.1=2.8lμmol/g 质量。

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