油红O染色液


  • 商品名称: 油红O染色液
  • 产品货号: 02.11175-20
  • 品牌: EallBio/亿奥邦
  • 储存条件: 2-8℃,避光
  • 有效期: 1年

所属分类:

细胞染色和探针

目录价:

¥ 90

市场价

¥ 90

  • 产品规格
    • 4×20ml
    • 4×50ml
数量
-
+

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1998

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  • 产品描述
    • 商品名称: 油红O染色液
    • 产品货号: 02.11175-20
    • 品牌: EallBio/亿奥邦
    • 储存条件: 2-8℃,避光
    • 有效期: 1年

    产品简介:

    脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,是一种不溶于水而溶于有机溶剂的化合物。脂类是脂肪酸与醇脱水缩合生成的酯及其衍生物,动物体内主要包括脂肪(Fats)、磷脂(Phospholipids)和类固醇(Steroids)等。人体的脂质主要有两种:一是储存脂质,如中性脂肪(即甘油三酯),主要分布于皮下、肾、胰腺等部位;二是结构脂质,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。脂滴是细胞内中性脂肪的主要贮存场所,在正常情况下,除脂肪细胞之外,其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴,如果细胞质内出现大量脂滴即指示为脂肪变性,常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。

    油红O(Oil Red O, 简称ORO)是一种脂溶性偶氮染料,是很强的脂溶性试剂和脂肪染色剂,能特异性地使细胞或组织内甘油三脂等中性脂质等染色,而对磷脂和类固醇等染色较弱。当细胞或组织切片浸入油红O染色液时,借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色,使其呈红色或橙红色。

    操作步骤:

    1. 工作液的配制:按照饱和油红O染色液:蒸馏水= 3:2的比例配成油红O工作液,混匀,室温放置5-10 min,过滤后使用。现用现配。

    2. 细胞染色

    (1) 移除细胞培养基,PBS洗两次,加固定液固定20-30 min。

    (2) 弃去固定液,用蒸馏水洗2次。

    (3) 60%异丙醇浸洗5 min。

    (4) 弃去60%异丙醇后加入油红O染色工作液,覆盖住底板即可,浸染10-20 min。

    (5) 弃去染色液,蒸馏水洗2-5次,洗去多余染液。

    (6) Mayer苏木素染色液复染核1-2 min。弃去染液后水洗2-5次。

    (7) 加入蒸馏水覆盖细胞并在显微镜下观察。

    3. 冰冻切片染色

    (1) 制作好的冰冻切片固定10 min,蒸馏水充分洗涤。

    (2) 60%异丙醇浸洗20-30s。

    (3) 油红O染色工作液染色10-15 min。

    (4) 60%异丙醇分化至间质清晰,蒸馏水中稍微清洗。

    (5) Mayer苏木素染色液复染核1-5 min。

    (6)(可选)自来水漂洗10 min或稀碳酸锂溶液中促蓝。

    (7) 蒸馏水中清洗。

    (8) 用滤纸吸干周围水分,甘油明胶封片并在显微镜下观察。

    4. 细胞涂片染色

    (1) 制备新鲜骨髓、血液涂片,林固定10-15 min。

    (2) 取出涂片,放于流通的空气中10-15 min。

    (3) 放入油红O染色工作液浸染15 min。

    (4) 60%异丙醇分化20-30 s,流水冲洗,蒸馏水清洗。

    (5) Mayer苏木素染色液复染核1-2 min。

    (6) 蒸馏水清洗。

    (7) 用滤纸吸干周围水分,甘油明胶封片并在显微镜下观察。

    注意事项:

    1. 油红O染色工作液不够稳定,易产生沉淀,不宜提前配制。

    2. 样品固定时请使用4%多聚甲醛固定液或10%福尔马林,不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。

    3. 油红O染色时,应及时补充以避免染色液挥发,否则染色液可能会形成沉淀而产生背景。

    4. 脂肪组织冰冻切片,冰冻温度比普通要低,切片厚度不可太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。

    5. 本试剂为油红O的饱和溶液,因此有少量沉淀为正常现象。使用时,应在配制成工作液后自行过滤。

    6. 为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。

     

     

                                                   

    图1. 小鼠脂肪肝油红O染色(红色为脂肪颗粒)

    A. 市售油红O染色试剂盒;B. 我公司油红O染色试剂盒

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